摘要
探讨温阳化浊通络方对系统性硬化病真皮微血管内皮细胞血管生成的促进作用及潜在机制。
SD大鼠分别灌胃15、30、60g/kg温阳化浊通络方及生理盐水制备低、中、高浓度含药血清和空白血清。体外培养人真皮微血管内皮细胞(HDMEC),经SSc患者血清处理建立SSc细胞模型,分为对照组、模型组、温阳化浊通络方低、中、高剂量组和EGCG组(Sema3A抑制剂),CCK-8检测细胞增殖,划痕检测细胞迁移,Matrigel体外成管实验检测血管生成,qRT-PCR及Western blot检测Sema3A、Nrp1、VEGFA、CD31、α-SMA mRNA和蛋白表达水平。
与对照组相比,模型组HDMEC细胞增殖率和迁移率下降,α-SMA、Sema3A、VEGFA蛋白和mRNA表达水平增加,CD31及Nrp1蛋白和mRNA表达水平降低,血管生成受到抑制(P<0.05);与模型组相比,温阳化浊通络方低、中、高剂量含药血清组及EGCG组均可提高HDMEC细胞存活率和迁移率,降低α-SMA、Sema3A、VEGFA蛋白和mRNA表达水平,促进CD31及Nrp1蛋白和mRNA表达水平,增强血管生成(P<0.05)。
温阳化浊通络方可能通过调节Sema3A/Nrp1信号通路促进SSc HDMEC细胞增殖、迁移和血管生成。
