血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）虽被广泛证实可调控骨免疫微环境，但其直接应用易受剂量依赖的血管过度增生及破骨活化等副作用限制。为绕过上述瓶颈，本研究拟借助巨噬细胞分泌的外泌体（VEGF-Exo）作为“细胞间信使”，评估其能否在保留VEGF促骨效能的同时规避全身毒性，并解析其miRNA调控网络。

以VEGF刺激小鼠RAW264.7单核-巨噬细胞系，超速离心收集外泌体；通过TEM形态学、纳米流式粒径、CD63/TSG101蛋白印迹及免疫荧光完成外泌体鉴定。随后将VEGF-Exo与小鼠BMSCs共培养，第3天行qRT-PCR定量成骨谱系标志物（ALP、OPN、OPG、OCN、COL1A1）。Small-RNAseq结合生物信息学（GO/KEGG、miRNA-mRNA网络）筛选差异miRNA并预测靶通路。

将各组外泌体与BMSC共培养，第3天的RT-PCR结果显示VEGF-Exo组的成骨标志物ALP、OPN、OPG、OCN、COL I的表达显著高于DMEM-Exo组。通过smallRNA测序和生物信息分析在VEGF-Exo组相对于DMEM-Exo组中筛选出了miR-7a-5p、miR-148a-3p、miR-203-3p、miR-194-5p等差异miRNA，其候选靶基因富集在黏着斑通路、TNF信号通路等。

VEGF诱导的巨噬细胞外泌体可通过传递特定miRNA簇（miR-7a-5p/148a-3p/203-3p/194-5p）激活成骨相关通路，为开发骨再生核酸制剂提供了理论依据与候选分子靶点。