摘要
目的:通过构建骨膜类器官,以促进于临床骨缺损的修复与再生
方法:构建骨膜类器官体外长期培养体系;采用免疫荧光检测类器官对骨膜组织结构特征的模拟情况,采用裸鼠皮下移植实验,确定骨膜类器官的成骨潜能;通过单细胞测序进一步解析骨膜类器官的细胞组成;通过共培养验证类器官对HSCs的维持能力;通过股骨和颅骨缺损模型探究类器官对骨缺损的修复能力。
结果:本项研究成功构建了骨膜类器官,类器官表达骨膜特异性标志物periostin,其表达模式类似于原始骨膜组织,呈现为形成层高表达,纤维层低表达的表达模式,模拟原生骨膜的组织结构。骨膜类器官在体外可长期稳定维持到30代以上,并在体内移植中维持稳定而鲜活的成骨能力,并重现HSCs微环境。单细胞测序揭示了骨膜类器官在传代过程中维持原生骨膜中的细胞类型。骨膜类器官能在体外维持造血干细胞表型并防止衰老,并且能促进股骨和颅骨损伤修复。
结论:1) 骨膜类器官模拟骨膜组织的细胞组成,具有和骨膜相似的组织结构。 2) 骨膜类器官能在体外长期维持,并始终保持鲜活的体内成骨潜能; 3) 骨膜类器官能在体外维持HSCs,并在体内重建HSCs微环境; 4) 骨膜类器官能促进股骨和颅骨损伤修复
