探讨转录因子E2F3在神经母细胞瘤进展中的作用机制，重点解析其通过调控细胞周期相关基因CDC6影响肿瘤增殖、转移及凋亡的分子通路。

生物信息学分析：通过GSE16237、GSE181559、GSE62564数据集，筛选预后相关转录因子及细胞周期相关基因。

细胞功能实验：

增殖：CCK8、克隆形成实验

迁移：Transwell小室实验

周期/凋亡：流式细胞术

分子机制验证：

qPCR/Western Blot检测E2F3、CDC6及下游因子（Cyclin A/E、Bcl-2）的mRNA/蛋白表达水平

ChIP-Seq、ChIP-qPCR和双荧光素酶报告基因验证E2F3通过直接结合CDC6启动子促进其转录调控

体内实验：小鼠皮下成瘤模型评估E2F3对肿瘤生长及预后的影响。

E2F3在神经母细胞瘤中高表达且预后不良：

E2F3在预后较差患者样本中表达显著上调（GSE16237、GSE181559、GSE62564数据集及临床样本分析，P<0.05）；单细胞测序（GSE147766、GSE137804）显示其在G2/S期NB细胞表达最高。

E2F3促进恶性表型：

敲低E2F3抑制增殖（CCK8增殖率↓42%）、迁移（Transwell迁移细胞数↓55%）并促进凋亡（凋亡率↑2.3倍），阻滞G1/S期转换（流式细胞术）。

E2F3-CDC6调控轴：

CDC6在神经母细胞瘤中高表达且与预后密切相关（GSE16237、GSE181559、GSE62564数据集及临床样本分析，P<0.05）；

E2F3直接结合CDC6启动子（ChIP-qPCR富集度↑5.8倍，P<0.05；双荧光素酶活性↑7.3倍，P<0.05）。

下游通路：

E2F3通过CDC6上调Cyclin A/E及Bcl-2；回补E2F3可逆转CDC6敲低导致的表型抑制。

体内验证：

E2F3过表达促进小鼠成瘤（肿瘤体积↑68%，重量↑52%），缩短生存期（P<0.001）。

E2F3作为关键转录因子，直接结合CDC6启动子并激活其表达，通过上调Cyclin A/E（驱动G1/S期转换）和Bcl-2（抑制凋亡），促进神经母细胞瘤增殖、转移。靶向E2F3-CDC6轴可能为NB提供新型治疗策略。