外周CD4+CD8+双阳性（DP）T细胞已被认为与自身免疫性疾病的发病机制相关，然而，循环DP T细胞的精确致病机制尚不清楚。本研究旨在识别关键致病性DP T细胞亚群，并为自身免疫性疾病（包括类风湿关节炎，RA）开发相应的靶向治疗策略。

本研究采用单细胞RNA测序（scRNA-seq）分析RA患者和健康对照（HC）外周血中的DP T细胞，并通过流式细胞术验证关键亚群频率的变化。通过对差异表达基因的综合分析、伪时间轨迹推断以及细胞间通信网络的研究，我们识别了IL-27/ANXA1信号轴作为关键调控通路。体外实验中，我们从RA患者中分离DP T细胞，并用重组IL-27或IL-27中和抗体处理，随后通过流式细胞术分析确定ANXA1阳性细胞的百分比。在胶原诱导性关节炎（CIA）小鼠模型中，我们系统性给予重组IL-27或IL-27抗体，并通过流式细胞术确定脾脏中DP T细胞的频率，同时通过临床评分和组织病理学评估来量化关节炎症。

通过scRNA-seq，我们在RA患者中发现了一个独特的GZMB+ DP T细胞亚群，该亚群表现出IL27RA的显著下调，并通过ANXA1介导与单核细胞发生异常的细胞间通信。流式细胞术分析显示，与HC相比，RA患者外周血中GZMB+ DP T细胞亚群显著扩增。体外实验中，IL-27能够抑制DP T细胞中ANXA1+ GZMB+ 细胞的比例，而IL-27阻断则逆转了这一效应。在CIA小鼠模型中，IL-27治疗降低了脾脏中DP T细胞的比例，并减轻了关节肿胀，而IL-27抑制则加剧了小鼠的实验性关节炎。从机制上讲，IL-27通过ANXA1依赖的途径限制DP T细胞介导的致病反应。

GZMB+CD4+CD8+ T细胞是DP T细胞中的一个致病性亚群，其在RA的进展中发挥重要作用。重要的是，IL-27通过调节DP T细胞的分化——特别是GZMB+ DP T细胞亚群——以及抑制GZMB+CD4+CD8+ T细胞与单核细胞之间ANXA1介导的细胞间通信发挥治疗作用，从而为RA提供了一种潜在的治疗策略。