肝缺血再灌注损伤（HIRI）是肝脏外科术后肝功能障碍及移植失败的主要病理因素，缺血再灌注可诱发内质网应激。冬凌草甲素（Oridonin, ORI）具有抗炎、抗氧化活性，但其缓解HIRI的具体机制不明，本研究旨在探讨ORI是否通过调控Keap1-MFN2-PERK信号轴抑制内质网应激发挥肝保护作用。

本研究建立70%肝脏缺血再灌注小鼠模型及AML12细胞缺氧/复氧（Hypoxia/Reoxygenation, H/R），体内通过H&E染色、血清肝酶检测等评估肝损伤，体外分析线粒体功能及氧化应激状态。进一步利用Co-IP、RT-qPCR等检测相关蛋白表达及相互作用，通过AAV-shRNA及siRNA构建MFN2和Keap1敲低模型，验证二者在ORI保护机制中的关键作用。

ORI剂量依赖性降低HIRI小鼠血清肝酶水平，减轻肝组织损伤、氧化应激及细胞凋亡；在H/R处理的AML12细胞中，ORI恢复线粒体膜电位、减少ROS产生。机制上，ORI与Keap1结合，增强Keap1/PGAM5复合物稳定性，抑制Parkin募集，减少MFN2泛素化降解，抑制PERK信号通路活化。敲低MFN2或Keap1均显著削弱ORI的保护效应，提示Keap1-MFN2轴在ORI保护作用中关键作用。

本研究首次揭示ORI通过直接靶向Keap1，稳定Keap1/PGAM5复合物，调控MFN2-PERK信号通路介导的内质网应激，从而有效减轻HIRI。本研究为ORI在肝外科手术及肝移植中防治HIRI提供了实验依据。