针对临界尺寸骨缺损修复难题，本研究旨在开发一种新型无细胞骨组织工程支架，并验证骨髓间充质干细胞聚集体囊泡（BMSCs CA-EVs）相较于普通囊泡（BMSCs EVs）是否具有更强的促成骨能力。通过将CA-EVs与脱细胞鱼鳞支架（DC-FS）结合，构建功能化复合材料，以增强骨再生。

制备并表征DC-FS、BMSCs EVs、CA-EVs，将材料分为DC-FS组、EVs/DC-FS组和CA-EVs/DC-FS组。通过体外实验评估各组对BMSCs成骨分化的影响，并利用miRNA测序探讨其分子机制。建立大鼠颅骨缺损模型，采用Micro-CT和组织染色在体评价骨再生效果。

 DC-FS支架保留了天然微图案结构，生物相容性良好。与EVs/DC-FS组相比，CA-EVs/DC-FS组在体外诱导了更显著的钙结节沉积，矿物钙磷比达1.89，更接近羟基磷灰石理想化学计量，且矿化结构更为有序。机制上，CA-EVs通过其独特的miRNA cargo显著上调Sirt1表达，进而激活Wnt/β-catenin通路，促进成骨关键转录因子表达。体内实验显示，CA-EVs/DC-FS组在大鼠颅骨缺损模型中修复效果最佳。

本研究成功构建了负载BMSCs CA-EVs的功能化脱细胞鱼鳞支架，该支架通过仿生结构与Sirt1/Wnt通路激活的协同作用，显著增强成骨分化与骨再生能力，为下一代无细胞骨组织工程植入物的设计提供了新策略与理论依据。