摘要
种植体的骨整合依赖于成骨细胞的增殖、分化及骨基质的沉积。本研究拟构建负载 miR-27a 的磷脂酰丝氨酸脂质体,评估其对小鼠前成骨细胞 MC3T3-E1 增殖、分化及成骨相关基因表达的影响,探索其在骨组织再生中的应用前景。
采用薄膜水合法制备负载 miR-27a 的磷脂酰丝氨酸脂质体。将脂质体与小鼠胚胎前成骨细胞MC3T3-E1 共培养, miRNA qRT-PCR 检测转染效率。采用 CCK-8 实验评估负载 miR-27a 磷脂酰丝氨酸对细胞增殖的影响。成骨分化能力分别通过碱性磷酸酶活性测定、茜素红染色以及 RT-PCR 检测成骨相关基因表达水平进行评估。
透射电镜下,PSL@miR-27a 为单囊类圆形颗粒,动态光散射法测得粒径为 98.76 nm。PSL@miR-27a 显著延缓 miR-27a 被核酸酶降解的时间。成骨分化实验显示,与对照组相比,PSL@miR-27a 组碱性磷酸酶活性增强,茜素红染色显示钙结节形成显著增加。PSL@miR-27a 上调了 ALP、Runx2、OCN 等成骨标志物的表达。
本研究成功构建了负载 miR-27a 的磷脂酰丝氨酸脂质体。PSL@miR-27a 在体外实验中表现出促进 MC3T3-E1 细胞成骨分化的生物学效应。
