枯否细胞（KCs）诱导肝内病毒特异性 T 细胞耗竭是乙型肝炎病毒（HBV）感染持续存在的关键机制，然而 HBV 感染过程中逆转 KC 免疫耐受的潜在调控机制尚未被完全阐明，亟待深入研究以挖掘 HBV 治疗的新靶点与新策略。

本研究通过流式细胞术、Western Blot、Seahorse能量代谢分析、转录组学研究等方法探讨了不同TLR激动剂单独及联合谷氨酰胺抑制剂DON对KC表型、极化状态、代谢状态及其诱导的CD8+ T细胞效应应答和增殖状态的影响。通过构建靶向肝脏的载药脂质体将TLR9激动剂联合DON导入肝内，研究其对KC细胞极化，肝内HBV特异性T细胞应答及病毒清除的影响。

TLR9激动剂在体外诱导KCs分泌IL-12,促进其向M1型极化从而增强KCs诱导的T细胞分泌效应细胞因子的能力和增殖水平。在慢性HBV复制小鼠模型中过继转移TLR9激活后的 KCs 可促进HBV-特异性T细胞应答并抑制HBV的复制与表达，但效果并不显著。然而，TLR9 激动剂联合谷氨酰胺抑制剂DON 能进一步显著促进 KC 的 M1 极化，上调 IL-12、下调 IL-10 分泌，强化 CD8+T 细胞分泌效应细胞因子的能力。机制上，TLR9 激动剂联合谷氨酰胺拮抗剂可通过调控 mTORC1/mTORC2 平衡及代谢重编程逆转 KC 诱导的 T 细胞免疫耐受。与此一致，在慢性HBV复制小鼠模型中，靶向肝脏的载有TLR9激动剂和DON双药的脂质体显著促进HBV-特异性T细胞应答，从而促进病毒清除。

TLR9激动剂激活KCs并重编程代谢，谷氨酰胺抑制剂协同增强其免疫功能。靶向KCs的双载药脂质体实现显著病毒清除和持久T细胞免疫重建，提供创新的代谢免疫联合治疗策略。