子宫内膜癌是女性生殖系统常见恶性肿瘤，发病率呈逐年上升趋势，靶向治疗已成为改善患者预后的重要方向。XDS-1作为天然化合物，具有低毒性及潜在抗肿瘤活性，但在子宫内膜癌中的作用及机制尚未明确。本研究旨在探讨XDS-1对子宫内膜癌 HEC-1B、ISHIKAWA 细胞增殖、迁移、侵袭及细胞周期的影响，明确其是否通过调控 RAF1/MAPK 信号通路发挥作用，为子宫内膜癌的靶向治疗提供实验依据与潜在药物靶点。

人子宫内膜癌 HEC-1B 细胞（ATCC No.HTB-113/112）与 ISHIKAWA 细胞（ATCC No.13347）均采用含 10% 胎牛血清、1% 青霉素-链霉素的DMEM培养基，置于 37℃、5% CO₂恒温培养箱中常规传代培养，选取对数生长期细胞用于后续实验；细胞增殖检测采用 CCK-8 法，设置 0.5 μM、0.75 μM、1.0 μM、1.5 μM 四种 XDS-1浓度梯度，分别于培养0 h、24 h、48 h、72 h时检测细胞光密度值，评估药物对两种细胞增殖的抑制效应，细胞迁移检测采用划痕愈合实验，HEC-1B细胞选用4.0 μM药物浓度，ISHIKAWA细胞选用1.0 μM药物浓度，分别于0 h、24 h拍摄划痕区域图像并计算愈合率，细胞侵袭检测采用Transwell侵袭实验，药物浓度同划痕愈合实验，培养48h后经结晶紫染色并计数穿透基质膜的细胞数量，细胞周期检测采用流式细胞术，HEC-1B细胞用1.0 μM药物处理，ISHIKAWA细胞用0.75 μM药物处理，24 h后经PI染色并分析细胞周期分布情况；核心靶基因筛选通过PubChem数据库获取XDS-1的潜在靶基因，利用GEPIA数据库筛选子宫内膜癌组织与正常组织的差异表达基因，通过SangerBox绘制Venn图获取交集基因，借助STRING数据库构建蛋白-蛋白相互作用网络，运用Cytoscape软件采用Closeness等6种算法筛选核心靶基因；分子机制检测采用Western blot法检测药物处理组与对照组细胞中RAF1、ERK1/2蛋白的相对表达量，明确信号通路激活状态；统计分析采用GraphPad Prism 10.0软件，定量数据以均数 ± 标准差表示，组间比较采用Student's t检验或单因素方差分析，P<0.05为差异具有统计学意义。

PubChem 数据库共获取XD-1靶基因30个，GEPIA数据库筛选出子宫内膜癌差异表达基因7131个，两者交集得到11个基因，经STRING构建蛋白网络及Cytoscape分析，最终确定MAPK1、MAPK3、RAF1为核心靶基因；呈浓度依赖性和时间依赖性抑制HEC-1B、ISHIKAWA细胞增殖，其中ISHIKAWA细胞对药物更敏感，1.5 μM XDS-1对ISHIKAWA细胞的抑制效应与20 μM对HEC-1B细胞的抑制效应相当；药物处理组24 h划痕愈合率显著低于对照组，Transwell实验中药物处理组侵袭细胞数明显减少，差异均具有统计学意义（P<0.01），表明XDS-1可显著抑制子宫内膜癌细胞的迁移和侵袭能力；ISHIKAWA细胞经药物处理后G1期细胞占比（47.3%）显著高于对照组（33.7%），S期、G2期占比降低，HEC-1B细胞药物处理后G2期占比显著高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.01），提示XDS-1可诱导不同细胞株出现特异性周期阻滞；Western blot结果显示，药物处理组RAF1、ERK1/2蛋白相对表达量显著低于对照组（P<0.01），表明XDS-1可下调RAF1/MAPK信号通路活性。

本研究证实，XDS-1可有效抑制子宫内膜癌HEC-1B、ISHIKAWA细胞的增殖、迁移及侵袭能力，并诱导细胞周期阻滞，且对不同细胞株的周期阻滞效应存在差异（ISHIKAWA 细胞阻滞于 G1 期，HEC-1B 细胞阻滞于 G2 期）。其作用机制与下调RAF1/MAPK信号通路活性密切相关。鉴于XDS-1为天然化合物，具有毒性较低的优势，本研究为其作为子宫内膜癌潜在治疗药物提供了实验支撑。后续将通过体内实验进一步验证其疗效，为推动其临床转化奠定基础。