细胞焦亡是一种促炎性程序性细胞死亡方式，可能参与牙周炎等多种口腔感染性疾病的进程。然而，细胞焦亡在种植体周炎致骨缺损中发挥的作用及机制尚未见报道。本研究旨在探讨Caspase-3/GSDME焦亡通路抑制对缓解成骨细胞炎症反应的作用，及其对炎症状态下成骨功能的挽救效果。并通过RNA测序分析炎症状态下的差异基因，锁定CDKN1A作为潜在的焦亡上游调控基因，进一步探讨敲低CDKN1A对Caspase-3/GSDME介导的焦亡过程的影响。

本研究使用喷砂酸蚀（SLA）纯钛表面培养MG-63人成骨样细胞，应用丁酸钠（NaB）模拟种植体周炎环境，诱导细胞发生焦亡。通过Western blot、LDH释放实验、流式细胞术和透射电镜（TEM）观察焦亡特征。qPCR和ELISA实验检测炎症分子的表达水平；设计并包装GSDME基因稳定敲低的慢病毒shRNA干扰载体并感染人成骨细胞系，ALP染色、qPCR和Western blot检测成骨功能。高通量RNA测序分析NaB处理后的差异表达基因，尤其关注与细胞周期、衰老等相关的基因。利用siRNA构建CDKN1A基因敲低的细胞模型，进一步通过上述实验明确炎症状态下CDKN1A在焦亡中的作用。

1.    细胞焦亡调控分子GSDME敲低缓解炎症反应并挽救成骨功能： NaB刺激后，成骨细胞发生典型的焦亡形态学变化，Western blot结果显示Caspase-3及GSDME-NT表达显著升高，LDH释放增加，表明NaB通过Caspase-3/GSDME通路诱导细胞焦亡。敲低GSDME基因后，促炎因子IL-6和IL-8的表达和分泌显著下降，炎症反应得到缓解，并且成骨标志物ALP、RUNX2、OPN的表达有所恢复，表明敲低GSDME能够挽救受损的成骨功能。

2.  RNA测序分析锁定CDKN1A基因可能位于Caspase-3/GSDME上游发挥作用：KEGG富集分析显示NaB处理后差异基因富集在“细胞周期”、“细胞衰老”等生物学过程中。进一步分析锁定了CDKN1A作为潜在的上游调控因子，并通过qPCR和Western blot验证了CDKN1A在NaB处理后表达显著升高。

3.    敲低CDKN1A缓解Caspase-3/GSDME通路介导的焦亡： 通过CDKN1A基因敲低，Western blot分析表明，敲低CDKN1A基因显著减少了cleaved Caspase-3和GSDME-NT焦亡标志物的表达；同时LDH释放减少；TEM观察显示，抑制CDKN1A后，成骨细胞的膜孔数量显著减少，焦亡得到缓解。

1.    NaB通过Caspase-3/GSDME通路诱导成骨细胞发生焦亡，抑制该通路可显著缓解炎症反应并挽救成骨功能

2.    抑制CDKN1A能够有效缓解Caspase-3/GSDME通路介导的焦亡，提示CDKN1A在成骨细胞焦亡中的调控作用，为种植体周炎的治疗提供新的靶点。