研究旨在探讨鞘磷脂（Sphingomyelin, SM）代谢通过神经酰胺（Ceramide, Cer）调控痛风性关节炎中破骨细胞分化的分子机制，重点关注 SMPD3/Cer24:1-HO-1/GPX4 轴在活性氧（ROS）介导骨侵蚀中的作用，为痛风性骨侵蚀的治疗提供新的理论依据和潜在靶点。

研究首先分离C57BL/6 小鼠骨髓源性巨噬细胞（BMDM），并采用 50 ng/mL 的 RANKL 和 30 ng/mL 的 M-CSF 在体外诱导破骨细胞分化，构建细胞模型。随后进行了一系列干预处理，包括添加 6.25–50 μM 的鞘磷脂（SM）及 5 μM 的 Cer24:1，使用 5 μM 的 SMPD3 抑制剂 GW4869 及 si-SMPD3 进行基因沉默，同时引入铁死亡抑制剂 Ferrostatin-1（Fer-1）。为深入探究相关机制，本研究通过转录组学和脂质组学联合分析，发现了小鼠骨髓单核细胞向破骨细胞（OC）分化过程中鞘磷脂代谢基因和代谢物的变化，此外，还通过多种方式进行功能验证，如 TRAP 染色鉴定成熟破骨细胞，Western Blot 检测 SMPD3、HO-1、GPX4 蛋白，qPCR 分析破骨相关基因（TRAP、CTSK、MMP9），以及免疫荧光及 ELISA 定量 ROS、MDA、GSH 水平。

在破骨细胞分化过程中存在鞘磷脂代谢重编程现象，具体表现为 SM 降低 47.2%（P<0.01），Cer24:1 升高 2.8 倍（P<0.001），且 SMPD3 基因表达随时间递增，在分化第 4 天上调 3.5 倍（P<0.001）。关于 Cer24:1 对破骨分化的作用，实验发现 Cer24:1 使 TRAP⁺多核细胞数增加 2.1 倍（P<0.01），并激活破骨基因（TRAP↑230%，CTSK↑180%），而 SMPD3 抑制（GW4869/si-SMPD3）则使成熟破骨细胞减少 68%（P<0.01）。在 ROS - 铁死亡机制方面，Cer24:1 会抑制 HO-1/GPX4 轴（蛋白表达下降 60–70%，P<0.001），导致 ROS 升高 3.2 倍（P<0.001）、MDA↑220%（P<0.001）、GSH↓45%（P<0.01），不过 Fer-1 可逆转 Cer24:1 的效应（GPX4 恢复至 85%，P<0.01），同时 SMPD3 沉默能上调 HO-1/GPX4（↑40%，P<0.05），降低 ROS 水平（↓50%，P<0.01）。组学联合分析表明，小鼠骨髓单核细胞向破骨细胞（OC）分化过程中鞘磷脂分解酶基因（如SMPD3）在破骨细胞分化过程中表达逐步上调，且细胞代谢和铁死亡通路富集。

鞘磷脂代谢酶 SMPD3 通过水解 SM 生成神经酰胺 Cer24:1，抑制 HO-1/GPX4 抗氧化轴，诱发 ROS 累积和铁死亡，进而驱动破骨细胞分化及痛风骨侵蚀。这一发现表明，靶向 SMPD3/Cer24:1-HO-1/GPX4 信号轴有望为痛风性骨侵蚀提供新型治疗策略。