探索活化蛋白C（aPC)干预对辅助性T17（Th17）细胞分化及功能的影响，及其对实验性干燥综合征（ESS）模型鼠疾病进程的影响。

使用小鼠脾脏细胞制备单细胞悬液，并富集初始 CD4+ T细胞，在Th17极化条件 (50 ng/ml IL-6+20 ng/ml IL-23+3 ng/ml TGF-β1）下刺激分化，给予或不予 aPC (100 nM, HY-P1918, MCE, USA) 处理，培养72小时后收集细胞，使用流式细胞术检测分泌粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor，GM-CSF）的致病性GM-CSF+ Th17细胞分化及Th17细胞表面白介素-23受体 （Interleukin-12 Receptor，IL-23R）的表达情况。收集上清使用酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA） 检测IL-17A水平。通过细胞实验，体外验证aPC对Th17细胞分化的影响。为探究aPC对干燥鼠发病进程及体内对Th17细胞分化的影响，使用C57BL/6J雌性小鼠15只，分为空白对照组、磷酸盐缓冲盐溶液（PBS）处理模型组、aPC处理模型组，ESS模型构建采用小鼠唾液腺蛋白免疫法诱导法。于第二次免疫后开始干预，aPC处理组以2 mg/kg剂量腹腔注射aPC，每周3次，持续8周；PBS组注射等体积PBS缓冲液。分别在免疫后第2、4、6、8、10及12周收集小鼠唾液，以评估唾液流率动态变化。干预结束后处死小鼠，取脾脏、颈部淋巴结及颌下腺组织。采用流式细胞术分析脾脏和淋巴结中T和B细胞亚群的组成与比例，检测颌下腺T细胞亚群的浸润情况，并通过H&E染色与免疫荧光染色结合共聚焦显微镜扫描评估颌下腺中炎症浸润程度和组织损伤情况PBS缓冲液。

体外实验结果显示，与空白对照相比，aPC处理小鼠脾脏初始CD4+T细胞分化为致病性GM-CSF+Th17细胞亚群、IL-22+Th17细胞亚群的数量及比例明显减少，Th17细胞表面IL-23受体的表达下调，IL-17分泌较少。动物实验结果显示，相较于PBS处理组干燥模型小鼠，给予aPC干预，可改善干燥模型小鼠唾液分泌功能，减少血清抗SSA抗体、抗M3R抗体及IL-17A的产生，减少干燥模型小鼠颌下腺组织中CD4+T细胞浸润，改善组织病理学评分。流式细胞术分析干燥模型小鼠免疫细胞变化，结果显示，aPC能够减少干燥模型小鼠脾脏和淋巴结中Th17细胞、GM-CSF+Th17细胞、Th1细胞、生发中心B细胞、浆细胞的比例，减少颌下腺中Th17细胞、Th1细胞细胞的浸润。

本研究结果显示，外源性给予aPC，可有效改善干燥模型小鼠的唾液分泌功能，减少自身抗体及IL-17A产生。进一步研究结果显示，在体外及体外aPC均可有效抑制致病性Th17细胞亚群的分化及功能。提示aPC可能通过抑制致病性Th17细胞分化及功能，影响干燥综合征的疾病进程。