探讨胸腺素β4（Tβ4）在乳腺癌细胞增殖、迁移、上皮-间质转化（EMT）、血管生成及凋亡中的作用机制，明确其作为乳腺癌治疗新靶点的潜力。

构建Tβ4过表达和沉默细胞株，以调控乳腺癌细胞系中Tβ4的水平，选择低表达Tβ4的MDA-MB-231细胞和高表达Tβ4的SK-BR-3细胞。在体外功能实验中，细胞增殖通过MTT法和克隆形成实验进行评估；迁移和侵袭能力则通过划痕愈合实验和Transwell迁移实验来检测；EMT进程的分析采用Western blot和免疫荧光技术检测EMT标志物；血管生成的研究通过内皮细胞管形成实验，并检测血管生成因子；凋亡分析则通过Hoechst 33342染色和Western blot检测凋亡相关蛋白。在体内实验方面，采用裸鼠皮下移植瘤模型，通过高频超声成像动态监测肿瘤的生长及血流情况，同时进行免疫组化分析以评估肿瘤组织中Ki67、EMT标志物及VEGF的表达。

Tβ4的过表达显著促进了MDA-MB-231细胞的活性和克隆形成能力，统计学分析具有显著差异（P<0.01）。相反，沉默Tβ4则抑制了SK-BR-3细胞的增殖。在EMT方面，Tβ4的过表达加速了细胞的迁移和侵袭，具体表现为划痕愈合率和Transwell穿透细胞数的增加，同时下调了上皮标志物，而上调了间质标志物，统计学分析具有显著差异（P<0.001）。在促进血管生成方面，Tβ4的过表达增强了HUVECs和HLECs的管腔形成能力，并且上调了MMP2、MMP9及VEGF的表达（P<0.01）。此外，Tβ4的过表达还表现出抗凋亡作用，具体表现为下调了Caspase-3和Caspase-8的蛋白水平，增加了Bax与Bcl-2的比值，并减少了凋亡小体的形成（P<0.01）。在体内验证方面，Tβ4过表达组的肿瘤体积和重量显著增加（P<0.001），高频超声观察显示肿瘤形态不规则且血流丰富；免疫组化分析证实了Ki67的表达上升、E-Cadherin的表达下降、Vimentin的表达上升以及VEGF的表达上升（P<0.01）。

结论：Tβ4通过激活EMT进程、增强血管生成因子表达、抑制凋亡，驱动乳腺癌细胞增殖、迁移及转移，是乳腺癌恶性进展的关键促进因子。靶向干预Tβ4信号通路有望成为乳腺癌治疗的新策略。