结合CD28或4-1BB共刺激域的靶向CD19嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法是复发/难治性（R/R）B细胞淋巴瘤的标准疗法。结合CD28共刺激域的靶向CD19的CAR-T产品疗效显著，但与4-1BB共刺激域的产品相比，其免疫效应细胞相关神经毒性综合征（ICANS）和严重细胞因子释放综合征（CRS）的发生率较高。因此，R/R B细胞淋巴瘤患者仍需要高效低毒的CAR-T产品。

Toll样受体2（TLR2）由T细胞表达，其参与可增强T细胞扩增、调节细胞因子产生以及延长记忆T细胞的寿命。临床前研究表明，在CD28和CD3ζ之间插入TLR2的胞内结构域，能使CAR-T细胞减少ICANS相关细胞因子GM-CSF和IFN-γ的产生，同时维持稳态细胞因子IL-7的产生。基于此，有研究者探索了结合CD28和TLR2共刺激域的新型第三代靶向CD19的CAR-T产品的疗效和安全性。

01研究方法

研究者完成了WZTL-002的首次人体I期剂量递增试验，该试验包括用于R/R B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）患者的自体1928T2z CAR-T细胞（“ENABLE”，NCT04049513）。该试验采用3+3剂量递增设计，剂量为5×10⁴-1×10⁶CAR-T细胞/kg。在氟达拉滨（30mg/m²/d）+环磷酰胺（500mg/m²/d）的淋巴细胞清除方案给药3天后，纳入的患者接受静脉注射WZTL-002 CAR-T细胞产品。

02研究结果

在剂量递增试验中接受治疗的21例患者中，中位年龄为57（23–70）岁；10例（48%）为女性；4（19%）例为毛利人。患者的疾病特征和剂量水平具体见表1。所有患者（n=21）既往接受过中位4线治疗，其中11例（52%）接受过自体造血干细胞移植，1例接受过异基因造血干细胞移植。WZTL-002 CAR-T细胞CD4⁺表达中位值为49%、CD8⁺为41%，CD62L⁺为34%。

截至2023年6月14日，所有患者均已达到主要随访时间点（WZTL-002给药后3个月），11例患者达到完全缓解（CR）。最常见（发生率≥10%）的≥3级不良事件为：中性粒细胞减少症（95%）、淋巴细胞减少症（57%）、低丙种球蛋白血症（57%）、贫血（43%）、发热性中性粒细胞减少症（43%）、血小板减少症（24%）和肿瘤疼痛（19%）。13例患者（62%）发生了1–2级CRS，其中6例接受了托珠单抗，3例接受了地塞米松。≥3级CRS和任何级别ICANS未发生。输注后第21天发生了两次4级血细胞减少的剂量限制性毒性事件（5×105和1×10⁶CAR-T细胞/kg，各1次），均于输注后第90天时降至2级；该试验剂量未达到最大耐受剂量。在所有剂量水平下均有反应，输注后第3个月时11例（52%）患者出现完全代谢缓解。WZTL-002 CAR-T细胞在所有剂量水平下均扩增。在接受0.5–1.0×10⁶CAR-T细胞/kg输注的患者（n=12）中，CAR-T细胞水平中位峰值（C_max）为93950转基因拷贝/μg（中位第10天达到）；在输注后第90天时，9/11例（82%）患者仍持续存在CAR-T细胞。II期推荐剂量（RP2D）确定为0.5–1×10⁶CAR-T细胞/kg。

表1.纳入患者疾病特征及疗效结果

03研究结论

该试验表明，结合CD28和TLR2共刺激域的新型第三代靶向CD19的CAR-T细胞产品在R/R B-NHL患者中未引起严重CRS和任何级别ICANS，且在所有剂量水平下都达到CR。整体而言，结合临床前研究结果，在CD28和CD3ζ结构域间插入TLR2结构域可降低CAR-T细胞相关ICANS的发生率，同时保持相应的疗效。