提高梅毒检测质量控制梅毒疾病传播

——Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗体检测多中心研究结果出炉

当前，梅毒的流行率和发病率在全球范围内均呈现上升趋势。据世界卫生组织统计，全球约有 3,600 万人感染梅毒，每年新发梅毒感染病例高达1,200万，其中200万为孕妇。中国梅毒疫情同样严峻，发病率平均年增长率达11%。从2011年起，每年新增梅毒感染病例约40万，已成为报告病例数最多的传染性疾病。

关于梅毒防控工作，早在2010年，我国卫生部就下发了关于《中国预防与控制梅毒规划（2010－2020）》；随后2011年发布了《预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播工作实施方案》，指出控制梅毒疾病传播的主要措施是提高梅毒实验室检测质量和加强梅毒筛查力度，尤其是对高危人群和献血员的筛查。今年6月，为进一步控制艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播，率先消除儿童新发感染，卫计委决定自2015年起在全国全面开展预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播工作。由于梅毒在早期阶段可实现治愈，尽早进行梅毒筛查和诊断，及早预防和治疗，对尽早切断传染源，有效控制梅毒的传播意义重大。

在日前举办的“第十届全国检验与临床学术会议暨2015年中国医师协会检验医师年会”上，南京医科大学第一附属医院（江苏省人民医院）检验学部主任潘世扬教授分享了Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗体检测多中心研究结果，以及高敏感性与高特异性梅毒筛查手段的临床应用价值，以期指导临床实践，进一步提高梅毒检测质量，控制梅毒疾病传播。

梅毒检测方法不一，电化学发光法成为国际主流

实验室中常用的梅毒检测主要分为病原体检测与血清学检测。由于大多数梅毒感染者早期无症状，使得梅毒的病原体检测无从实施；因而，血清学检测成为实验室诊断梅毒的主要手段。梅毒血清学检测分为：梅毒螺旋体非特异性抗体检测和梅毒螺旋体特异性抗体检测。前者主要包括：性病研究实验室试验（VDSL），快速血浆反应素试验（RPR）和甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）；后者主要有：梅毒螺旋体血凝试验（TPHA），荧光密螺旋体抗体吸附试验（FTA-ABS），梅毒酶联免疫吸附试验（TPELISA），梅毒化学发光免疫分析法/电化学发光免疫法（TPCLIA/TPECLIA）。

临床检测工作中，梅毒筛查与诊断有按照梅毒非特异性抗体和梅毒特异性抗体检测的先后次序，人为地将这两种路径称为反向检测和正向检测两种检测顺序。反向检测是先检测梅毒螺旋体特异的抗体，诸如TPECLIA、酶免疫测定（TPEIA）梅毒螺旋体乳胶凝集（TPHA）等，反向检测阳性的患者，再用非梅毒螺旋体的抗原去检测非梅毒螺旋体的抗体，用于梅毒的临床诊断与治疗疗效的观察与预后的判断；而正向检测则是先检测非梅毒螺旋体抗体，以RPR和VDRL等检测方法为主，然后用梅毒螺旋体特异性的抗原去检测梅毒螺旋体的抗体。

相比于传统手工检测，TPCLIA/ TPECLIA具有自动化和高通量的特点，同时实现了高样本量条件下的低成本，从高端医院到普通医院都可以使用；全封闭的检查体系使临床检验医师避免直接接触病人血液，实验室生物危害更少；定量的结果非常客观，同时可以检测免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）抗体，因此该技术可用于诊断早期梅毒感染。

目前，对于梅毒的实验室筛查与诊断流程，越来越多地倾向于用梅毒螺旋体特异性抗体检测在线的反向检测流程。如，欧洲推荐TPEIA 或TPHA(凝集法)用于筛查，条件允许的情况下可做其他检测，结果不一致时用免疫印迹法排除；德国将TPEIA用于筛查，FTA-Abs用于确证，结果不一致时用免疫印迹法/凝集法/临床表现排除。美国以前使用先检测梅毒螺旋体非特异性抗体，然后用梅毒螺旋体特异性抗体检测进行确证的这一梅毒筛查与诊断的正向检测流程，当结果不一致时用凝集法排除。然而现在，包括美国在内的大多数国家，基本上首先采用梅毒螺旋体特异性抗体进行筛查，对于阳性的结果再采用梅毒非特异性抗体检测，以主要用于临床抗梅毒治疗的疗效观察。

国际范围内，，不同国家梅毒的诊断指南有所不同。有两种主流诊断指南，欧洲指南推荐梅毒螺旋体特异性抗体检测用于筛查，因梅毒感染晚期灵敏度较差和生物学假阳性反应等原因，不建议将梅毒螺旋体非特异性抗体检测用于筛查；而在美国，与以往采用正向检测的指南有所不同的是，现在大样本量的实验室已开始使用自动化梅毒螺旋体特异性抗体检测进行筛查，再用梅毒螺旋体非特异性抗体进行后续检测。

《2014年欧洲梅毒管理指南》明确指出，自动化化学发光检测已经用于欧洲许多大型实验室，尤其适合对无症状人群和献血者进行高通量筛查。由于化学发光的检测灵敏度高，该检测对早期梅毒感染筛查更具优势。加利福尼亚大学公共健康学系性传播疾病控制机构对1996年至2009年美国梅毒检测方法的变化进行了研究，发现化学发光法的测试数量逐年增加。现在，电化学发光法已被绝大多数医院和检测机构采用。

强有力循证医学证据：Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗体检测多中心研究结果出炉

作为梅毒反向检测的新成员与有力补充，罗氏诊断Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗原特异性抗体电化学发光检测试剂盒于 2014 年 8 月正式在中国获批上市。该技术使用双抗原夹心法（DAGS）检测梅毒螺旋体总抗体，血清样本仅需10μL，在18分钟时间内即可完成整个检测过程。

2015年1月，Clinical and Vaccine Immunology杂志发表了一项由全球6个国家8家研究中心参与的梅毒检测国际多中心研究结果，将Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗体检测与其他方法学梅毒检测试剂比对，并对其敏感性及特异性进行比较评估。在与其他四种检测试剂进行敏感性评估中，入组了928例样本，确诊阳性922例，阴性6例，Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体特异性抗体检测在所有实验室中的敏感度结果均达到100%，并且可100%检测出不同分期梅毒样本；入组8,079例样本（包括3,500例常规样本和4,579例献血员样本）的特异性评估试验，对包括Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗体检测在内的七种检测试剂进行了比较，结果显示Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗体检测在献血员样本和常规样本中的总体特异性分别达到99.93%和99.80%。

为提供更具参考性的中国证据及使用经验，四川大学华西医院联合全国其他14家医院共同开展了“罗氏诊断新一代Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗体检测试剂性能比对多中心研究”，旨在自然条件下比较Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗体检测技术与已在国内上市的其他四种方法学梅毒检测试剂的灵敏性与特异性。作为罗氏诊断迄今为止样本量最大及涵盖研究中心最多的研究，该研究自 2014 年 4 月开始以来，已完成了所有样本检测和结果统计分析。该研究纳入总量为19,627例的四组样本，包括随机样本、确诊样本、干扰样本和“临界”样本。

最终结果表明，Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗体检测在所有常规随机样本中的阳性率为4.97%，剔除传染病院数据后的阳性率为2.58%；与所有比对方法在常规随机样本中的一致性达到99.48%；在所有比对组随机样本中的假阳性和假阴性结果均最少，敏感性均达到100%，特异性也更优异。此外，Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗体检测试剂及所有比对试剂均能100%检测出不同分期的确诊梅毒样本；各组共收集920例干扰样本，仅出现8例假阳或假阴结果，对结果基本无干扰，但Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗体检测在所有比对组“临界”样本中的假阳性和假阴性结果更少。

该研究带来了更强有力的循证医学证据，证实Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗体检测具有绝佳的灵敏性与特异性，可有效检出不同分期的梅毒感染，有效提高梅毒检测质量，控制梅毒疾病传播。同时，Elecsys® Syphilis梅毒螺旋体抗体检测能够连续批量处理样本，大幅度提高检测速度，实现工作流程优化；高精密度和无灰区的特性使检测结果解读更为明确，降低了确诊实验需求，从而达到了提高效率、降低成本的目的，为实验室和患者实现获益最大化。