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「基层医药学会官微」出品

华南分子论坛|CACA指南中国行基因检测篇巡讲-珠海站

7月，是盛夏的开始，也是一年中最具活力和生机的时节。在这个美丽的季节中，华南分子论坛暨CACA指南中国行—基因检测篇巡讲活动于7月6日在广东省珠海市圆满举行。本次会议由广东省基层医药学会细胞病理与分子诊断专委会和珠海市医学会病理学分会共同主办，由中山大学附属第五医院负责承办。

为期一天的会议日程紧凑而富有成效，会议主要围绕CACA指南基因检测、分子检测技术质控、肿瘤NGS、案例分享及临床生物信息解读等多个前沿话题进行了深入的讨论，各个领域的专家学者齐聚一堂，不仅分享了宝贵的见解和经验，还激发了热烈的现场讨论。参会者普遍反映，从这次会议中获得了极大的启发和帮助。

会议由中山大学附属第五医院病理科主任林宇静教授做开场主持，随后，中国抗癌协会理事长樊代明院士、中山大学附属第五医院副院长陈明远教授、珠海市医学会会长梅文华教授、中山大学附属第一医院王连唐教授、中山大学附属第三医院病理科主任邵春奎教授以及广东省基层医药学会细胞病理与分子诊断专委会欧阳能太教授相继发表了致辞。

林宇静教授开场主持

樊代明院士致辞

陈明远教授致辞

梅文华教授致辞

王连唐教授致辞

邵春奎教授致辞

欧阳能太主委致辞

上午场

上午场的会议由八位专家教授轮流主持，分别是中山大学附属第五医院陈红涛、林宇静、中山市人民医院储兵、中山大学附属第五医院江冠民、广州市第一人民医院杜洪、中山大学附属第三医院邵春奎、江门市中心医院周伟以及珠海市人民医院曹志星。

第一位讲者为中山大学附属第五医院曾发敏教授，她分享的题目是《浅谈NGS文库构建》。曾教授首先介绍了NGS文库构建的概念和重要性，以探针杂交的靶向测序为例，详细介绍了文库构建中DNA打断、末端修复、接头连接、文库扩增、文库纯化、杂交捕获等各个流程的实验原理和操作步骤。同时以保证产出合格和优质的文库为主题，围绕病理质控、组织DNA提取质控、预文库质控、终文库质控和下机数据质控等五个方面做了详细的阐述。

讨论环节，广州市番禺区中心医院王浩、中山大学孙逸仙纪念医院孙熹、江门市中心医院廖悦华、珠海市人民医院汪丽娟四位专家就文库构建中哪些步骤会直接影响测序的质量、预文库纯化前后，终文库纯化后无产物的常见原因和改善方法，以及自动化建库是否可以完全替代手工建库等问题展开了深入的讨论。

曾发敏教授

讨论专家：王浩、孙熹、廖悦华、汪丽娟

第二位讲者为中山大学附属第五医院曾志诚教授，他分享的题目是《NGS的测序原理》。曾教授以illumina测序平台为例，从文库制备、簇生成、测序、数据分析四个部分详细介绍了NGS测序的流程和原理，并比较了不同类型测序平台的特点。

讨论环节，广州市花都区人民医院徐国蕊、中山大学孙逸仙纪念医院黄靖华、中山大学附属第五医院肖彤洋、中山大学孙逸仙纪念医院苏梦婷四位专家就目前的测序平台种类繁多（单/双端测序，四/双/单SBS通道等），各有优缺点，作为临床工作者如何根据不同临床需求（肿瘤/病原/遗传等）挑选合适的测序平台；从测序原理的角度出发谈谈DNA质量差、降解严重的临床样本会对测序质量会产生哪些影响等问题展开了深入的讨论。

曾志诚教授

讨论专家：徐国蕊、黄靖华、肖彤洋、苏梦婷

第三位讲者为中山大学孙逸仙纪念医院罗知奇老师，她分享的题目是《PCR-毛细管电泳(CE)技术的原理与结果判读》。罗老师内容涵盖了sanger测序以及片段分析的检测原理、常见结果分析、质控要点以及相关结果的判读。丰富的经验分享让大家受益良多。最后，罗老师表示PCR-CE技术因其高灵敏度、高分辨率和自动化操作，在基因分型、突变检测、遗传病诊断等领域具有广泛应用。然而，优化PCR反应条件和CE分离条件以及解决非特异性扩增等问题仍是我们需要关注的重点。

讨论环节，广州医科大学附属中医医院江沂、广东省中医院珠海医院彭辉、中山大学附属第五医院刘瑞虹、江门市妇幼保健院王丽丽四位专家就一代测序MSI-H的检出与哪些临床因素相关，以及PCR-毛细管电泳(CE)技术与NGS相比的优势和局限性等问题展开了深入的讨论。

罗知奇老师

讨论专家：江沂、彭辉、刘瑞虹、王丽丽

第四位讲者为赛默飞付瑶玲博士，她分享的题目是《PCR-毛细管电泳(CE)技术的临床应用》。付博士首先总览介绍了毛细管电泳技术的主要应用领域包含肿瘤、生殖健康、药物基因组及传染病。其次重点分享了毛细管电泳在肿瘤领域的应用，主要为微卫星不稳定检测、淋巴瘤基因重排检测、肿瘤的用药指导诊断、人类白细胞抗原分型检测及STR检测。其中MSI检测中特别提到，毛细管电泳方法是MSI检测的金标准方法。该检测项目广泛应用于结直肠癌及林奇综合症的筛查，对肿瘤患者的用药和预后具有指导意义。

讨论环节、中山大学孙逸仙纪念医院张寅、珠海市中西医结合医院黄伟、珠海市妇女儿童医院吴晓媚三位专家就一个完善的分子实验室，你认为一代测序、二代测序、PCR等技术平台应该发挥什么样的作用？在遗传性疾病的诊断中，分子检测者、临床医生及遗传咨询师将分别扮演什么样的角色？我们应该如何使三者有机地结合到一起等问题展开了深入的讨论。

付瑶玲博士

讨论专家：张寅、黄伟、吴晓媚

下午场

下午场会议分别由八位专家依次担任主持工作，分别是：江门市中心医院李荣岗、中山大学附属第一医院王连唐、珠海市医学会病理学分会前主委任大宏、广东医科大学附属医院吴艳霞、中山市东凤人民医院曹晓哲、中山市人民医院孙世珺、江门市人民医院陈兰花、中山市中医院周梅。

第一位讲者为中山大学孙逸仙纪念医院李智教授，他分享的题目是《前列腺病变病理诊断新进展》。李教授主要围绕前列腺癌类型和前列腺癌分级系统的更新两方面进行了详细且专业的讲述，通过实际病例为大家进行了进一步的知识巩固。同时李教授总结了关于临床病理工作中的“四多”：多读书、多实践、多总结、多交流。最后李教授表示：前列腺癌的组织学诊断有一些新的进展和变化，对病理诊断者提出了更高的要求，只有反复实践，才能更为准确地诊断，更好地为临床和患者服务。

讨论环节，中山市中医院王书芹、中山市博爱医院米贤君、中山市小榄人民医院吴又明、广东省中医院珠海医院吴贻平四位专家就前列腺穿刺组织，肿瘤占比该怎么算？前列腺癌中的PIN样腺癌与导管腺癌在形态学上的鉴别点、前列腺导管腺癌与导管内癌的鉴别点、前列腺导管内癌的穿刺及全切标本都需要Gleason评分吗？前列腺癌，看到癌组织包裹神经束算不算侵犯神经？前列腺电切标本的前列腺癌的Gleason评分按照穿刺标本还是全切标本来报告和脐尿管癌的TNM分期是按照什么标准分期等多个问题展开了深入的讨论。

李智教授

讨论专家：王书芹、米贤军、吴又明、吴贻平

第二位讲者为深圳市第三人民医院成志强教授，他分享的题目是《肾细胞癌少见亚型介绍及病例分享》。成教授介绍了泌尿男性生殖肿瘤及2016年、2022年、2023年肾脏肿瘤WHO分类变化最新参考书目，并通过五个精彩的病例向大家分享了七种肾细胞癌少见亚型：包括双相型鳞样腺泡状肾细胞癌/双相型乳头状肾细胞癌、伴有极性反转的乳头状肾肿瘤、甲状腺样滤泡状肾细胞癌、肾脏低级别嗜酸性肿瘤、肾脏嗜酸性空泡状肿瘤、Warthin样乳头状肾细胞癌、双相透明变砂粒体型肾细胞癌，为大家传经送宝。最后成教授表示，随着NGS等分子检测技术的发展，越来越多肾细胞新实体或分型会更新，WHO分类会越来越精准。

讨论环节，中山市黄圃医院黄少浩、中山市小榄人民医院莫超华、台山市人民医院李红全三位专家就伴纤维肌样间质的肾细胞癌与ELOC突变的肾细胞癌的关系？如果形态学及免疫组化支持伴纤维肌样肾细胞癌，没有做分子检测，如何病理报告以及如果分子检测不支持ELOC突变，如何病理报告等问题展开了深入的讨论。

成志强教授

讨论专家：黄少浩、莫超华、李红全

第三位讲者为中山大学附属第五医院何建忠教授，他分享的题目是《肺癌:“靶”握一线，震“罕”出击》。何教授首先介绍了非小细胞肺癌罕见突变的基本情况，以及突变型、融合型和拷贝数改变型三种罕见变异分类。重点阐释了EGFR罕见位点突变对EGFR-TKI的不同反应，详细介绍了基于EGFR结构功能的MD安德森癌症中心（MDACC）新分类系统，最后分享了我国2023年非小细胞肺癌罕见靶点检测策略的专家共识。

讨论环节，中山大学孙逸仙纪念医院廖健伟、开平市中心医院张朝清、中山大学附属第五医院曾奇、中山大学附属第五医院王晓进四位专家就如何提高非小细胞肺癌罕见驱动基因变异的精准检测以及如何结合临床需求，规范非小细胞肺癌罕见驱动基因变异生信解读，同时非小细胞肺癌少见/罕见突变Panel临床该如何选择等问题展开了深入的讨论。

何建忠教授

讨论专家：王晓进、曾奇、张朝清、廖健伟

第四位讲者为中山大学孙逸仙纪念医院夏丹博士，她分享的题目是《ACMG胚系变异分类证据级别更新》。夏博士介绍道：为了不断的促进胚系变异解读的规范化，在2015版ACMG胚系变异解读基础上，临床基因组资源(ClinGen)建立了变异解读工作组(Sequence Variant Interpretation,SVI)和特定疾病或基因的解读专家组(Variant Curation Expert Panels, VCEPs)，对ACMG/AMP指南中的证据标准不定期进行更新和优化；此外，ACGS也会基于ACMG指南、ClinGen更新以及文献/循证/实践发布guidelines。夏博士的内容主要介绍了：人群数据证据、临床证据、变异类型特异证据以及计算机预测等证据内容的更新以及结合ACMG指南与贝叶斯定量的打分积分系统。最后总结提到胚系变异解读证据的使用是不断更新、细化并趋向打分积分制；证据的更新，实验室内是否使用需要内部、同行间讨论与完善；最终证据条款的使用，实验室内部要达成共识，保持一致。

讨论环节，中山大学孙逸仙纪念医院彭小芳、新会区人民医院李云辉、中山市古镇医院余睿三位专家就肿瘤胚系变异生信解读和诊疗思路，以及将胚系突变检测整合到常规肿瘤基因检测中的益处等问题展开了深入的讨论。